date:2022-05-12 15:52:17
腫瘤細(xì)胞在 3D 微環(huán)境中生長(zhǎng)，與周?chē)h(huán)境相互交流、相互作用。細(xì)胞行為在 3D 基質(zhì)中培養(yǎng)與 2D 環(huán)境中不同。在許多情況下，3D 細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)置更準(zhǔn)確地反映了體內(nèi)的狀況。這包括使用球體和類(lèi)器官的藥物篩選，這些球體和類(lèi)器官如今作為腫瘤模型是必不可少的。在分析癌細(xì)胞行為、遷移、增殖、對(duì)藥物治療的反應(yīng)以及基因和蛋白質(zhì)表達(dá)時(shí)，應(yīng)考慮到這一點(diǎn)。
HT-1080 癌細(xì)胞在 3D 膠原蛋白凝膠中的侵襲。 將侵入性人纖維肉瘤癌球體 (HT-1080) 嵌入 I 型膠原蛋白大鼠尾凝膠中。 在 µ-Slide 8 孔中記錄侵入凝膠基質(zhì) 48 小時(shí)。 4x 物鏡，明場(chǎng)
PDAC細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的類(lèi)器官共培養(yǎng)。 人胰腺癌 (PDAC) 細(xì)胞系 PA-TU-8988T（綠色，用 CellTrackerTM Green 染色）和鼠成纖維細(xì)胞系 mPSC4（紅色，用 CellTrackerTM Orange CMTMR 染色）在 µ-Slide Spheroid Perfusion 中的類(lèi)器官共培養(yǎng) . μ-Slide 覆蓋有 25 μm FEP 箔，用于在直立光片顯微鏡期間匹配更接近水的折射率。 該圖像由 MPI Muenster 的 S. Volkery 使用 M Squared Aurora Airy 光束直立光片設(shè)置獲取。 樣品由德國(guó)馬爾堡大學(xué)的 K. Roth 提供。
用于 3D 癌癥模型的 ibidi 解決方案
ibidi Collagen Type I, Rat Tail 是一種非胃蛋白酶處理的天然膠原蛋白，用于在凝膠基質(zhì)中對(duì) ECM 進(jìn)行建模。其快速聚合促進(jìn)了 3D 凝膠中的最佳細(xì)胞分布。
µ-Slide Spheroid Perfusion 是一種用于長(zhǎng)期球體培養(yǎng)的專用灌流小室。 3 x 7 孔中的每一個(gè)都形成了自己的微環(huán)境（niche），用于培養(yǎng)標(biāo)本。通過(guò)孔頂部的通道進(jìn)行灌注（例如，通過(guò)使用 ibidi 泵系統(tǒng)）可確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中實(shí)現(xiàn)最佳營(yíng)養(yǎng)和氧氣擴(kuò)散，而不會(huì)使標(biāo)本暴露在顯著的剪切力下。
具有多細(xì)胞 µ-Pattern載玻片可實(shí)現(xiàn)空間定義的細(xì)胞粘附，用于生成球體和類(lèi)器官、長(zhǎng)期培養(yǎng)和高分辨率成像。確定的粘附點(diǎn)能夠從細(xì)胞懸液中捕獲所有粘附的單細(xì)胞。周?chē)?span> Bioinert 表面是完全不粘附細(xì)胞的。這迫使所有細(xì)胞在粘附點(diǎn)處相互聚集，從而以明確和可控的方式形成球體。
Bioinert 是一種穩(wěn)定的生物惰性表面，用于在非粘附表面上對(duì)球體、類(lèi)器官和懸浮細(xì)胞進(jìn)行長(zhǎng)期培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡檢查，無(wú)需任何細(xì)胞或生物分子粘附。它目前可作為 µ-Dish 35 mm、高 Bioinert、µ-Slide 8 Well 高 Bioinert、µ-Slide 4 Well Bioinert 和 µ-Slide VI 0.4 Bioinert。
在 µ-Slide III 3D 灌注中，單細(xì)胞、球體或類(lèi)器官可以在凝膠層中或凝膠層上培養(yǎng)或嵌入 3D 基質(zhì)中。特殊的通道幾何形狀允許以低流速進(jìn)行灌注（例如，當(dāng)使用 ibidi 泵系統(tǒng)時(shí)），確保最佳的氧氣和營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)。這種設(shè)置使長(zhǎng)達(dá)數(shù)周的長(zhǎng)期培養(yǎng)成為可能。此外，薄蓋玻片底部可高分辨率成像。
µ-Slide 血管生成和 µ-Plate 血管生成 96 孔是凝膠基質(zhì)上或凝膠基質(zhì)中單細(xì)胞、共培養(yǎng)物、球體和類(lèi)器官的 3D 培養(yǎng)和顯微鏡觀察的簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)高效的解決方案。凝膠層直接連接到上面的培養(yǎng)基儲(chǔ)存器，通過(guò)擴(kuò)散可以快速輕松地更換培養(yǎng)基。對(duì)于特殊應(yīng)用，還可提供帶有 1.5H 玻璃底的 µ-Slide 血管生成載玻片。
μ-Slide I Luer 3D 設(shè)計(jì)用于在具有定義剪切應(yīng)力的 3D 凝膠基質(zhì)上或其中培養(yǎng)細(xì)胞。三個(gè)孔中的每一個(gè)都可以填充凝膠，細(xì)胞可以嵌入其中。對(duì)于定義流量的應(yīng)用，頂部的通道可以連接到泵（例如，連接到 ibidi 泵系統(tǒng)），以確保最佳的氧氣和營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)。
參考文獻(xiàn)：
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